【LB培养基配方】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛用于微生物学实验的通用液体培养基,尤其在大肠杆菌(Escherichia coli)的培养中应用最为普遍。它能够提供细菌生长所需的营养成分,包括碳源、氮源、无机盐和维生素等。LB培养基的配方简单且易于制备,适合实验室日常使用。
为了便于查阅与使用,以下是对LB培养基配方的总结,并以表格形式进行展示。
一、LB培养基的主要成分及作用
成分 | 含量(g/L) | 作用 |
胰蛋白胨(Tryptone) | 10 g | 提供氮源和氨基酸,促进细菌生长 |
酵母提取物(Yeast Extract) | 5 g | 提供维生素、矿物质和生长因子 |
氯化钠(NaCl) | 10 g | 维持渗透压,稳定细胞结构 |
琼脂(Agar) | 15–20 g(若为固体培养基) | 凝固剂,使培养基形成固体状态 |
蒸馏水 | 1 L | 溶解各成分 |
二、LB培养基的制备步骤(液体培养基)
1. 称量:按照上述比例准确称取胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
2. 溶解:将所有成分加入蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 灭菌:将溶液装入三角瓶或烧杯中,用高压蒸汽灭菌器在121℃下灭菌15–20分钟。
4. 冷却与使用:灭菌后冷却至适宜温度(通常为37℃左右),即可用于接种菌种。
三、注意事项
- 若需要制备固体培养基,需加入琼脂粉并调整用量。
- 不同实验室可能根据具体需求对配方进行微调,如添加抗生素或选择性成分。
- 使用前应检查培养基是否变质或污染,避免影响实验结果。
四、适用范围
LB培养基适用于大多数革兰氏阴性菌的增菌培养,尤其适用于大肠杆菌、链球菌等常见菌种的培养。此外,也可作为基础培养基用于后续的基因工程实验或菌株筛选。
通过以上内容可以看出,LB培养基因其成分明确、操作简便、成本低廉而成为实验室中的“万能培养基”。掌握其配方与制备方法,对于微生物实验的顺利开展具有重要意义。